Quantification des acides nucléiques par PCR quantitative en temps réel
Auteurs : Tse C1, Capeau JLa réaction de polymérisation en chaîne (PCR) est devenue un outil essentiel en biologie moléculaire et son application à la détection des acides nucléiques a révolutionné l'analyse quantitative des gènes et de leurs messagers. Ce concept technologique a rapidement évolué au cours de ces dernières années, et le nombre croissant des applications quantitatives de la PCR a contribué au développement de la PCR quantitative en temps réel. Cette revue décrit, après un bref rappel portant sur les bases mathématiques de la PCR, les principes de base de la quantification par PCR en temps réel (nouveau concept du cycle seuil) ainsi que ceux des chimies les plus employées pour la détection en tube clos des acides nucléiques (chimie SYBR Green I et chimies utilisant les sondes fluorogéniques, sondes TaqMan, sondes FRET en tandem et sondes Beacon). Elle discute des différentes stratégies de quantification et compare les systèmes de PCR quantitative en temps réel actuellement en compétition sur le marché. Les principales applications en biologie médicale sont également décrites.