IntroductionLes bactéries et/ou de champignons vivent souvent dans l’organisme humain sous forme de biofilm. Au sein de ces derniers, les micro-organismes synthétisent une matrice extracellulaire (MEC), qui les protège d’agressions extérieures.Stenotrophomonas maltophilia(Sm) est une bactérie Gram négatif émergente etAspergillus fumigatus(Af) est un champignon filamenteux, tous deux saprophytes de l’environnement. Ils cohabitent, notamment sous forme de biofilm, dans le tractus respiratoire des patients immunodéprimés ou atteints de mucoviscidose. L’objet de l’étude est :– de valider un modèle de biofilm mixteSm/Af ;– de comparer les biofilms simples au biofilm mixte.MéthodesLes cultures fongiques et/ou bactériennes ont été réalisées sans agitation sur des lames en polystyrène Labteck^®à 37 °C dans du milieu RPMI (SVF 10 %). La microscopie à balayage (MEB) a permis de visualiser les biofilms bactériens, fongiques et mixtes ainsi que la MEC après 24 h. La croissance des micro-organismes au sein du biofilm a été évaluée par méthode du cristal Violet et PCR quantitative (qPCR) pendant 36 h.RésultatsLes biofilms bactériens, fongiques et mixtes ont été visualisés en MEB avec mise en évidence de la MEC qui englobe les bactéries et les hyphes enchevêtrés. Un effet inhibiteur de la bactérie sur la croissanced’A. fumigatusa été observé par qPCR et par cristal violet…ConclusionUn biofilm mixteAf–Sma été validé par ces différentes méthodes. La croissance d’Af est ralentie dans le biofilm mixte. Ce modèle permettra l’étude d’interactions entre épithélium respiratoire et biofilm mixte bactérie – champignon et l’analyse de la réponse inflammatoire des cellules épithéliales respiratoire en présence de ce biofilm.